Optimizacion de la tecnica del agar venenoso en el antifungigrama

Abstract

La estandarización de una técnica que evalúe la susceptibilidad de los dermatofitos frente a los antifúngicos, ha sido difícil principalmente por las características de cultivo de estos hongos. La técnica del agar venenoso resulta confiable y altamente reproducible, aunque necesita una mayor disponibilidad de tiempo y alto gasto de materiales y medios de cultivo al aplicarla en el laboratorio, por este motivo fue necesario optimizar el método, para poder utilizarlo como una prueba que complemente el diagnóstico micológico y oriente al dermatólogo acerca del tratamiento adecuado para cada paciente, disminuyendo la posibilidad del fracaso en la terapia antifúngica.

En este estudio se varió la técnica en caja de petri de 100 x 15 mm por caja de 60 x 15 mm y caja dividida en cuatro compartimientos, el diámetro del inóculo se modificó de 10 a 7 mm, al reemplazar el cilindro de vidrio por uno de acero inoxidable con borde afilado para las dos pruebas alternas; se usaron las mismas cepas de Trichophyton rubrum y Trichophyton mentagrophytes ya utilizadas en un estudio preliminar frente a tres concentraciones de los antimicóticos itraconazol, griseofulvina y terbinafina, reportadas como las encontradas en uñas y estrato córneo a los 15 días después del inicio del tratamiento; conservando los mismos parámetros del método inicial como la concentración de los medicamentos, preparación del inóculo, tiempos de crecimiento y la lectura del hongo, además de la temperatura de incubación.

Para analizar si había diferencias entre los métodos se aplicó un diseño multifactorial de análisis de varianza ANOVA, donde se encontró que los resultados con cada uno de los métodos no son iguales estadísticamente en cuanto al porcentaje promedio de inhibición. La reproducibilidad de la técnica se evaluó comparando los porcentajes promedio de inhibición aportados por cada observador, sin encontrar diferencias significativas.

Aunque estadísticamente los métodos no son iguales, el método de agar venenoso usando caja dividida es el sugerido para reemplazar la técnica control, por ser el que presentó menor variación en relación con el otro método alterno (caja de petri de 60 x 15 mm) además de ofrecer mejores ventajas en cuanto a costo de los materiales y facilidad en el manejo de la caja.