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Detección molecular de virus de leucemia felina (felv) y virus de inmunodeficiencia felina (vif) mediante la técnica de pcr a partir de una muestra de gatos en bogotá

dc.contributor.advisorAristizabal Gutierrez, Fabio Ancizar
dc.contributor.advisorCastillo León, Luisa Fernanda
dc.contributor.advisorSanchez Mora, Ruth Melida
dc.contributor.authorCalderon Guerrero, Laura Paola
dc.contributor.authorMaldonado Reyes, Evelyn Catalina
dc.date.accessioned2026-05-07T20:52:19Z
dc.date.issued2025
dc.description.abstractEl presente trabajo se centró en la detección molecular de los virus de leucemia felina (FeLV) y de inmunodeficiencia felina (FIV) mediante la aplicación de la técnica de PCR a partir de muestras de hisopado oral obtenidas de gatos. Para ello, se llevó a cabo la estandarización de primers específicos y la caracterización de los rangos dinámicos de detección mediante ensayos de PCR uniplex y multiplex en tiempo real, logrando identificar cargas virales bajas con alta sensibilidad y especificidad. Las muestras de hisopados orales fueron sometidas a un proceso manual de extracción de ARN mediante el método salting out, el cual permitió obtener material genético de calidad suficiente para la amplificación, aunque se evidenciaron leves impurezas en algunos extractos. La amplificación del gen endógeno VEGFA, empleado como control interno, confirmó la integridad del ARN y la ausencia de inhibidores en las reacciones, garantizando la fiabilidad de los resultados. De las muestras analizadas, se detectó un caso positivo para FeLV y ninguno para FIV. Se observó cierta variabilidad en los resultados atribuible a diferencias en la técnica de muestreo, ya que la toma de muestras fue realizada por distintos voluntarios. Este hallazgo coincide con investigaciones previas que destacan la necesidad de estandarizar los procedimientos de recolección para optimizar la reproducibilidad diagnóstica. En síntesis, el sistema RT-qPCR multiplex desarrollado y validado en este estudio representa una herramienta diagnóstica sensible, específica y confiable para la detección de FeLV y FIV, con potencial de aplicación tanto en el ámbito clínico como en estudios epidemiológicos de poblaciones felinas urbanas.spa
dc.description.degreelevelPregrado
dc.description.degreenameBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico
dc.description.tableofcontentsTABLA DE CONTENIDO ÍNDICE DE FIGURAS 7 ÍNDICE DE TABLAS 8 RESUMEN 9 1. INTRODUCCIÓN 10 2. OBJETIVOS 11 2.1 Objetivo general 11 2.2 Objetivos específicos 11 3. ANTECEDENTES 11 4. MARCO REFERENCIAL 14 4.1 Virus de leucemia felina (FeLV) 14 4.1.1 Estructura 14 4.1.2 Patogenia 15 4.1.3 Transmisión 17 4.1.4 Manifestaciones Clínicas 17 4.1.5 Tratamiento18 4.2 Inmunodeficiencia felina (FIV)18 4.2.1 Estructura 18 4.2.2 Patogenia19 4.2.3 Transmisión 20 4.2.4 Manifestaciones Clínicas 21 4.2.5 Tratamiento 21 4.3 Técnicas de detección 22 4.3.1. Técnicas convencionales 22 4.3.2. Técnicas moleculares 22 4.3.2.1. Reacción en cadena polimerasa (PCR) 23 4.3.2.2. PCR en tiempo real 26 4.3.2.3 PCR multiplex 27 4.4. Ventajas de las técnicas moleculares en detección viral 27 4.5 Métodos de extracción 28 4.5.1 Métodos manuales 28 4.5.1.1.Salting out 28 5. DISEÑO METODOLÓGICO 28 5.1. Universo, población, muestra 29 5.1.1. Universo 29 5.1.2. Población 29 5.1.3. Muestra 29 5.2 Hipótesis, variables, indicadores 29 5.2.1. Hipótesis 29 5.2.2.Variables e indicadores 29 5.3. Técnicas y procedimientos 30 5.4. Identificación de cebadores adecuados 30 5.5. PCR Uniplex 31 5.5.1. Evaluación PCR uniplex 31 5.6. Caracterización de rangos dinámicos 32 5.6.1. Evaluación qPCR uniplex 32 5.6.2. Curvas estándar 32 5.7. Toma de muestras hisopados orales 33 5.8. Extracción de ARN mediante método de Salting Out 33 5.8.1. Muestras de hisopados orales 33 5.8.2. Evaluación de la calidad del ARN 34 5.9. RT-qPCR Multiplex 34 6. RESULTADOS 35 6.1 Identificación de cebadores adecuados 35 6.2 PCR Uniplex 36 6.2.1. Evaluación PCR Uniplex 36 6.3. Caracterización de rangos dinámicos qPCR 36 6.4 Evaluación de ácidos nucleicos 39 6.5 RT-PCR One step Multiplex 40 7. DISCUSIÓN 40 8. CONCLUSIONES 44 9. RECOMENDACIONES 44 10. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 45 11. ANEXOS 48spa
dc.format.extent54p.
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.urihttps://repositorio.universidadmayor.edu.co/handle/unicolmayor/7379
dc.language.isospa
dc.publisherUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarca
dc.publisher.facultyFacultad de Ciencias de la Salud
dc.publisher.placeBOGOTÁ D.C
dc.publisher.programBacteriología y Laboratorio Clínico
dc.relation.referencesCollazos Paz MA. Coinfección y hallazgos epidemiológicos de los virus de inmunodeficiencia felina (vif) y leucemia felina (vilef) en gatos clínicamente enfermos [Internet]. Bibliotecas Pontificia Universidad Javeriana. Editorial Pontificia Universidad Javeriana; 2022 [citado el 4 de noviembre de 2024]. Disponible en: https://repository.javeriana.edu.co/handle/10554/20624
dc.relation.referencesJuan Felipe Calle-Restrepo, Laura Fernández González, Laura Marcela Morales-Zapata, Julián Ruiz-Sáenz. Virus de la leucemia felina: un patógeno actual que requiere atención en Colombia [Internet]. Edu.co. 2013 [citado el 4 de noviembre de 2024]. Disponible en: http://vetzootec.ucaldas.edu.co/downloads/v7n2a09.pdf
dc.relation.referencesLaura Alexandra Mejía Guzmán Lizeth Daniela Núñez Bocanegra. PRUEBAS DIAGNÓSTICAS PARA EL VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA FELINA (VIF) [Internet]. Edu.co. [citado el 4 de noviembre de 2024]. Disponible en: https://repository.ucc.edu.co/server/api/core/bitstreams/6e43f05c-cc64-433d-9364-993cd64ea 16f/content
dc.relation.referencesVelilla C, Martínez J, Soledad González M. Estandarización de PCR múltiple en tiempo real para el diagnóstico de sida y leucemia en Felis silvestris catus. CES Med Vet Zootec [Internet]. 2020;15(1):31–43 [citado el 4 de noviembre de 2024]. Disponible en: http://dx.doi.org/10.21615/cesmvz.15.1.3
dc.relation.referencesEspinoza ZGH. Detección molecular de Malassezia spp. y Cryptococcus spp. en piel de felinos con Virus de inmunodeficiencia Felino y/o Virus de Leucemia Felino [Internet]. Uanl.mx. diciembre 2022 [citado el 4 de noviembre de 2024]. Disponible en: http://eprints.uanl.mx/25578/1/1080328900.pdf
dc.relation.referencesVictor RM, Bicalho JM, Andrade MB, Bueno BL, de Abreu LRA, Bicalho AP da CV, et al. La detección molecular del vcemia felina en las mucosas oral, conjuntival y rectal proporciona reirus de la leusultados comparables a la detección en sangre. J Clin Microbiol [Internet]. 2020;58(2).[citado el 4 de noviembre de 2024] Disponible en: http://dx.doi.org/10.1128/JCM.01233-19
dc.relation.referencesJackson ML, Haines DM, Meric SM, Misra V. Feline leukemia virus detection by immunohistochemistry and polymerase chain reaction in formalin-fixed, paraf in-embedded tumor tissue from cats with lymphosarcoma [Internet]. Can J Vet Res. 1993 [citado 12 de mayo de 2025];57(4):269–276. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1263639/pdf/
dc.relation.referencesda Vida ÁDOCC. UNIVERSIDAD DE CAXIAS DEL SUL [Internet]. Ucs.br. 2021 [citado el 18 de octubre de 2025]. Disponible en: https://repositorio.ucs.br/xmlui/bitstream/handle/11338/11048/Disserta%c3%a7%c3%a3o%2 0Jessica%20Martins%20Tadeu.pdf?sequence=1&isAllowed=y
dc.relation.referencesLittle S, Levy J, Hartmann K, Hofmann-Lehmann R, Hosie M, Olah G, et al. Guías de la AAFP para las pruebas y el manejo de retrovirus felinos de 2020. J Feline Med Surg [Internet]. 2020;22(1):5–30. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1177/1098612X19895940
dc.relation.referencesSykes JE, Hartmann K. Feline Leukemia Virus Infection. Canine and Feline Infectious Diseases [Internet]. [citado 12 de mayo de 2025] 2014;224–38. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7152252/
dc.relation.referencesManuel Emilio Bolio-González, Hugo Ramírez-Álvarez, Carlos Josué Cen-Cen. Aspectos epidemiológicos, clínicos y de diagnóstico del ViLeF y VIF: una revisión actualizada [Internet]. Redalyc.org. 2019 [citado el 18 de octubre de 2025]. Disponible en: https://www.redalyc.org/journal/5600/560059566005/html/
dc.relation.referencesBęczkowski PM, Beatty JA. Feline immunodeficiency virus: Current knowledge and future directions. Adv Small Anim Care [Internet]. 2022 [citado 12 de mayo de 2025];3:145–59. Disponible en: https://doi.org/10.1016/j.yasa.2022.05.007
dc.relation.referencesHosie MJ, Addie DD, Belák S, Boucraut-Baralon C, Egberink H, Frymus T, et al. Feline immunodeficiency: ABCD guidelines on prevention and management. J Feline Med Surg [Internet]. 2009 [citado 15 de mayo de 2025];11(7):575–84. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19481037/
dc.relation.referencesWang X, Li Y, Wang Z, Zhang J, Li J. RNA interference inhibits hepatitis B virus replication in mice. J Virol [Internet]. [citado 15 de mayo de 2025] 2007 Nov;81(21):11354-60. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18040840/
dc.relation.referencesMéndez-Álvarez S, Pérez-Roth E. La PCR múltiple en microbiología clínica. Enfermedades Infecciosas Y Microbiología Clínica [Internet]. 2004 [citado el 18 de octubre de 2025];22(3):183–92. Disponible en: https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo -la-pcr-multiple-microbiologia-clinica-13058027
dc.relation.referencesDwivedi S, Purohit P, Misra R, Pareek P, Goel A, Khattri S, et al. Diseases and molecular diagnostics: A step closer to precision medicine. Indian J Clin Biochem [Internet]. 2017;32(4):374–98. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1007/s12291-017-0688-8
dc.relation.referencesSantos CdC, Valente KF. Detecção do vírus da imunodeficiência felina em gatos domésticos (Felis catus) pela técnica de reação em cadeia mediada pela polimerase [Internet]. Belém: Universidade Federal Rural da Amazônia; 2019 [citado el 15 de mayo de 2025]. 27 p. Disponible en: http://veterinaria.ufra.edu.br/images/tcc-defendidos/TCC_Camila_de_Cssia_dos_Santos.pdf? utm_source
dc.relation.referencesTamay de Dios L, Ibarra C, Velasquillo C. Fundamentos de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y de la PCR en tiempo real [Internet]. Investigación en Discapacidad. 2013 [citado el 15 de mayo de 2025];2(2):70–8. Disponible en: https://inmunojmvucv.wordpress.com/wp-content/uploads/2018/01/pcr-fundamentos-invest-dis cap-2013.pdf
dc.relation.referencesRíos Sánchez E, Calleros E, González Zamora A, Rubio J, Martínez OC, Martínez A, et al. Análisis comparativo de diferentes métodos de extracción de ADN y su eficiencia de genotipado en población mexicana. Acta Univ [Internet]. 2016;26(4):56–65. Disponible en: https://www.scielo.org.mx/pdf/au/v26n4/2007-9621-au-26-04-00056.pdf
dc.relation.referencesChen D, Dong YS, Bao YM, Xiu ZL. Salting-out extraction of recombinant κ-carrageenase and phage T7 released from Escherichia coli cells. Engineering in Life Sciences [Internet]. [citado 16 de mayo de 2025] 2023;23(5):504-518. Disponible en: https://analyticalsciencejournals.onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1002/elsc.202200125
dc.relation.referencesAndrea Balboni, Verónica Fácil ,Laura Gallina ,María Chiara Sabetti ,Francesco Dondi yMara Battilani. Detección molecular y caracterización genética del virus de la inmunodeficiencia felina (VIF) en gatos seropositivos del norte de Italia [Internet]. Mdpi.com. 2024 [citado el 18 de octubre de 2025]. Disponible en: https://www.mdpi.com/2076-0817/13/6/463
dc.relation.referencesWestman ME, Malik R, Hall E, Sheehy PA, Norris JM. Determining the feline immunodeficiency virus (FIV) status of FIV-vaccinated cats using point-of-care antibody kits. Comp Immunol Microbiol Infect Dis [Internet]. 2015;42:43–52. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.cimid.2015.07.004
dc.relation.referencesAlireza Javadi, Masoud Shamaei Leila Mohammadi Ziazi, Mihan Pourabdollah, Atosa Dorudinia, Seyed Mohammad Seyedmehdi, Shirin Karimi. Estudio de calificación de dos métodos de extracción de ADN genómico en diferentes muestras clínicas [Internet]. Publicado. 2014 [citado el 18 de octubre de 2025]. Disponible en: https://pmc-ncbi-nlm-nih-gov.translate.goog/articles/PMC4386014/?_x_tr_sl=en&_x_tr_tl=e s&_x_tr_hl=es&_x_tr_pto=tc
dc.relation.referencesWestman ME, Malik R, Hall E, Sheehy PA, Norris JM. Comparación de tres kits de prueba de antígenos en el punto de atención del virus de la leucemia felina (FeLV) con sangre y saliva. Comp Immunol Microbiol Infect Dis [Internet]. 2017;50:88–96. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.cimid.2016.11.014
dc.relation.referencesWestman ME, Malik R, Hall E, Norris JM. Diagnóstico de la infección por el virus de la inmunodeficiencia felina (VIF) en gatos vacunados y no vacunados mediante saliva. Comp Immunol Microbiol Infect Dis [Internet]. 2016;46:66–72. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.cimid.2016.03.006
dc.relation.referencesGuillen-Gonzalez F, Castillo-Hidalgo E. PREVALENCIA DE LEUCEMIA VIRAL FELINA EN GATOS DOMÉSTICOS LOCALIZADOS EN SANTO DOMINGO DE LOS TSÁCHILAS, ECUADOR. Revista ESPAMCIENCIA [Internet]. 2023 [citado el 18 de octubre de 2025];14(1):8–14. Disponible en: https://portal.amelica.org/ameli/journal/527/5274499002/html/
dc.rightsAl consultar y hacer uso de este recurso, está aceptando las condiciones de uso establecidas por los autores
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dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
dc.subject.proposalFelinos
dc.subject.proposalPCR
dc.subject.proposalDetección molecular
dc.subject.proposalExtracción de ARN
dc.subject.proposalFIV
dc.subject.proposalFeLV
dc.titleDetección molecular de virus de leucemia felina (felv) y virus de inmunodeficiencia felina (vif) mediante la técnica de pcr a partir de una muestra de gatos en bogotáspa
dc.typeTrabajo de grado - Pregrado
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dc.type.coarversionhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85
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