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Evaluación de la eficiencia en dos técnicas de biología molecular para el diagnóstico de sífilis congénita.

dc.contributor.advisorHelguera Repetto , Addy Cecilia
dc.contributor.advisorCruz Baquero , Claudia Andrea
dc.contributor.authorAlgarra Tavera , Gino Nicolas
dc.contributor.authorPáramo Cipagauta , Angie Jimena
dc.date.accessioned2026-05-06T23:36:31Z
dc.date.issued2025
dc.description.abstractLa sífilis congénita (SC) es una infección sistémica causada por la espiroqueta Treponema pallidum subespecie pallidum, la cual genera graves complicaciones neonatales, convirtiéndola en un problema de salud pública en Colombia. El diagnóstico se basa en la detección de reaginas mediante pruebas no treponémicas, confirmadas con pruebas treponémicas en caso de reactividad. Sin embargo, estas pruebas presentan una eficacia limitada para diagnosticar la sífilis congénita, ya que poseen baja especificidad y requieren que los títulos en los neonatos sean cuatro veces mayores que los de la madre, con el riesgo de que estos títulos sean resultado del traspaso placentario de anticuerpos maternos. Con base en este contexto, en este análisis se evaluó la eficiencia y efectividad analítica de dos técnicas de biología molecular (qPCR Sybr Green /qPCR sonda TaqMan) a través de la detección de dos genes específicos de T. pallidum (polA y TpN47 respectivamente), mediante el montaje de curvas estándar y el análisis de 30 muestras de neonatos con sospecha de sífilis congénita, se obtuvo una eficiencia de 116.5% para Sybr Green y 168.65% para Sonda TaqMan, así mismo se alcanzó una sensibilidad de 1000 fg/uL y 0.01 fg/uL respectivamente. Los resultados mostraron valores similares en las características técnicas para las dos pruebas, mostrando su potencial en la detección del patógeno en muestras neonatales, sin embargo, la técnica qPCR TaqMan presentó una mayor sensibilidad analítica. Los resultados de esta investigación son fundamentales para el desarrollo de un protocolo de diagnóstico de sífilis congénita basado en técnicas de biología molecular.spa
dc.description.degreelevelPregrado
dc.description.degreenameBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico
dc.description.tableofcontentsResumen 11 Introducción 12 Objetivo general 14 Objetivos específicos 14 1. Antecedentes 15 2. Marco referencial 18 2.1. Treponema pallidum 18 2.1.1. Genoma 19 2.1.2. Inmunología 20 2.1.2.1 Factores de virulencia 20 2.1.2.2. Mecanismos de la inmunidad 21 2.1.2.3. Evasión 21 2.2 Sífilis 22 2.3. Sífilis gestacional 23 2.4. Sífilis congénita 24 2.4.1 Infección neonatal 24 2.4.2. Estadios de la sífilis congénita 24 2.4.2.1 Sífilis congénita temprana 25 2.4.2.2 Sífilis congénita tardía 25 2.4.3 Epidemiología 25 2.4.4 Diagnóstico sífilis congénita 27 2.4.4.1. Pruebas serológicas 27 2.4.4.1.1. Pruebas no treponémicas 28 2.4.4.1.2. Pruebas treponémicas 28 2.4.4.2. Pruebas directas e indirectas 29 2.4.4.3. Pruebas de diagnóstico molecular 29 2.4.4.3.1. Extracción de material genético por columnas de sílice 30 2.4.4.3.2 qPCR sonda TaqMan 30 2.4.4.3.2.1. TpN 47 31 2.4.4.3.3. qPCR Sybr Green 31 2.4.4.3.3.1. polA 32 2.4.5. Tratamiento y medidas de prevención 32 3. Diseño metodológico 34 3.1. Universo, población, muestra 34 3.2. Hipótesis, variables, indicadores 34 3.3. Técnicas y procedimientos 35 3.3.1. Recolección de datos 35 3.3.2. Obtención DNA control 35 3.3.3. Extracción y cuantificación de DNA 36 3.3.4. Evaluación de técnicas qPCR 37 3.3.4.1. Sybr Green 37 3.3.4.2. Sonda TaqMan 37 3.3.5. Detección de Treponema pallidum en muestras clínicas 38 3.3.5.1 Detección del Treponema pallidum qPCR con Sybr Green 38 3.3.5.2 Detección del Treponema pallidum qPCR TaqMan 38 3.3.6 Análisis de resultados 38 3.3.6.1 Curva estándar 38 3.3.6.2 Muestras clínicas 39 3.3.6.3 Comparación de técnicas 39 4. Resultados 40 4.1 Resultados serológicos 40 4.2 qPCR Sybr Green 40 4.2.1 Curva estándar qPCR Sybr Green 40 4.2.2 Especificidad qPCR Sybr Green 42 4.2.3. Resultados muestras qPCR Sybr Green 44 4.2.4. Repetitividad qPCR Sybr Green 45 4.3. qPCR sonda TaqMan 45 4.3.1. Curva estándar qPCR sonda TaqMan 45 4.3.2. Acercamiento a la especificidad qPCR sonda TaqMan 47 4.3.3. Resultados muestras qPCR sonda TaqMan 48 4.3.4. Repetitividad qPCR sonda TaqMan 50 4.4. Comparación de técnicas qPCR Sybr Green vs qPCR sonda TaqMan 51 4.4.1. Eficiencia, sensibilidad y especificidad analíticas 51 4.4.2. Costos y facilidad de montaje 52 4.4.3. Análisis estadístico 52 5. Discusión 54 6. Conclusiones 59 7. Referencias bibliográficas 61 8. Anexos 68spa
dc.format.extent76
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.urihttps://repositorio.universidadmayor.edu.co/handle/unicolmayor/7367
dc.language.isospa
dc.publisherUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarca
dc.publisher.facultyFacultad de Ciencias de la Salud
dc.publisher.placeBogotá D.C,
dc.publisher.programBacteriología y Laboratorio Clínico
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dc.rights.licenseAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
dc.subject.proposalSífilis congénitaspa
dc.subject.proposalqPCR Sybr Greenspa
dc.subject.proposalqPCR sonda TaqManspa
dc.subject.proposalpolAspa
dc.subject.proposalTpN47spa
dc.subject.proposalEficiencia analíticaspa
dc.subject.proposalEfectividad analítica salud pública.spa
dc.titleEvaluación de la eficiencia en dos técnicas de biología molecular para el diagnóstico de sífilis congénita.spa
dc.typeTrabajo de grado - Pregrado
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.type.coarversionhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85
dc.type.contentText
dc.type.driverinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesis
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